流式细胞检测-流式细胞检测,流式,细胞,检测

人体常识理工科学怎样才能赤脚走过烧得通红的钢板

脚底摸了一些特殊的东西，类似麻药的效果，降低人对疼的 感知 。然后非常快速的通过火炭 。但是楼主说 赤脚通过1500度的钢板，这好像牛逼了点

人体常识有哪些

这个问题太大了，我来帮你回答一点吧:视力不要过度疲劳，不要暴饮暴食

人体常识问题

5个90%的人都相信的错误常识，你肯定还蒙在鼓里

关于人体常识

首先要看你的头发发卷的半径 如果是黑人一样的小卷,并且头发容易打节 梳起来很粗糙 那很不幸 这会让你的魅力大打折扣.
如果你的头发像星球大战前传3里的扮演阿纳金的海登.克里格登一样的较小卷(直径2-3CM),并且柔软,光滑,比较细,那恭喜你,你属于魅力型男人.
如果你头发是大波浪,那很明显,你属于浪子型男人.

其次是遗传 你怎么知道不属于遗传因素呢? 因为你爸爸妈妈都不是卷发? 错 卷发有可能属于隐性基因控制,意思就是说,有可能你爹妈都不是卷发 但是各带一个隐性基因,那么你的头发有1/4的概率是卷发.
当然这只是假设,不过一般来说,卷发只可能是由遗传因素导致的,只不过无法直接观察父母的头发来判断孩子是否卷发.
卷发与直发的不同在于.卷发的头发横截面是三角形的, 而直发是圆形的,你小时侯直发 可能是因为孩子的头发太细,而长大后卷发,是因为头发变粗了比较有韧性
如果你实在不喜欢卷发 那你就光头或者离子烫把

我想找一本看了以后了解人体构造及一些医学常识的书。

人体解剖学
内科学，外科学，妇产科学，儿科学，都有卖

细胞内因子的流式检测是怎么回事？

细胞因子在淋巴细胞应答中有重要的免疫调节作用。细胞内因子的流式检测介绍，包括技术优势、操作步骤、应注意事项和染色结果对比。 随着研究的进展，仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括：ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析。。。 楼主可以到生物帮那里详细的了解下，那里有比较详细的介绍，我在上个星期看到过，生物帮内容主要包括生命科学领域产品、技术文档、视频等，可以看下 www.bio1000.com/zt/cell/46213.html 会找到介绍的。

请教流式细胞的具体实验步骤是怎样的？

一 、细胞表面标记的检测
1.试剂平衡至室温。准备：消毒台面；穿戴工作服，帽子，口罩和手套，放置棉签，草纸和有盖垃圾桶（内装有消毒剂）。
2.写编号纸并编号。1----IgG1/ IgG1/ IgG12----CD4/CD8/CD33----CD14/CD454----
3.每管加相应的抗体10l/每种和50l全血，震荡，室温避光20分钟。加血前摇匀血样。
4.加入溶血素1ml，震荡后室温避光10分钟。
5.离心，1200转， 5分钟。弃上清，震荡。
6.加入PBS洗液2ml，震荡，离心，1200转， 5分钟。弃上清，震荡。
7.加入PBS 900l。上机前4度保存。
8.上机。
二 、细胞内细胞因子的检测
1.准备：消毒台面；穿戴工作服，帽子，口罩和手套，放置棉签，草纸和有盖垃圾桶（内装有消毒剂）。
2.写编号纸并编号。IgG1/ CD8/CD3IFN-gamma; /CD8/CD3
3.（3－5在超净台操作）取出PMA（1∶100），BFA（1∶10）和离子霉素（1∶10），使用无菌无叠氮钠PBS稀释储存液。
4.刺激：取全血或PBMCs（细胞数在0.5-1 106 ）50l/管，再加入50l RPMI1640进行稀释一倍，加入刺激剂PMA，离子霉素和BFA，混匀。最后在全血中的终浓度：PMA:50ng/ml离子霉素：1g/mlBFA：10g/ml。
5.37℃，5% CO2 ，4小时孵育(最好用培养箱，松盖) 。
6.胞外染色：各管中加入相应的表面抗体20l和激活的全血100l混匀，室温避光20分钟。
7.溶血：每管加入溶血素2ml，室温避光10分钟。离心，1200转， 5分钟。弃上清。
8.破膜通透：每管加入0.5ml通透剂，室温避光10分钟。加入2mlPBS，1000转，离心5分钟。弃上清。
9.胞内染色：加入IFN-gamma;或IgG1的抗体20l，混匀，室温避光30分钟。加入2ml PBS，1000转，离心5分钟，弃上清。
10.加入PBS 500l。上机前4度保存。
11.上机检测。
注意：本实验室可提供流式细胞检测服务或流式细胞仪,不会的新手可以自行上门观察.本实验室为正规三甲医院科研共享平台,所有开放的实验均为本实验最常规的技术服务,暂时开放的除了流式细胞术外还有荧光定量pcr,ChIP免疫沉淀,wester blot,细胞培养,细胞株.

流式细胞术的步骤？

流式细胞仪的操作和使用　　①打开电源，对系统进行预热； 　　 ②打开气体阈，调节　压力，获得适宜的液流速度；开启光源冷却系统； 　　 ③在样品管中加入去离子水，冲洗液流的喷嘴系统； 　　 ④利用校准标准样品，调整仪器，使在激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益调定的基础上，0和90散射的荧光强度最强，并要求变异系数为最小； 　　 ⑤选定流速、测量细胞数、测量参数等，在同样的工作条件下测量样品和对照样品；同时选择计算机屏上数据的显示方式，从而能直观掌握测量进程； 　　 ⑥样品测量完毕后，再用去离子水冲洗液流系统； 　 　⑦因为实验数据已存入计算机硬盘（有的机器还备有光盘系统，存贮量更大），因此可关闭气体、测量装置，而单独使用计算机进行数据处理； 　　 ⑧将所需结果打印出来。 细胞凋亡研究：细胞凋亡是细胞在基因控制下的有序死亡，在疾病发生、发展中有重要作用，因而研究细胞凋亡有重要意义。细胞凋亡检测方法很多，应用流式细胞仪技术可根据细胞在凋亡过程中发生一系列形态、生化变化从多个角度对细胞凋亡进行定性和定量的测定。

　 细胞分选：流式细胞仪能够分选某一亚群细胞,分选纯度＞95%。目前细胞分选主要用于研究，临床应用较少。利用流式细胞仪分选免疫担当细胞进行细胞免疫学研究也是目前的热门课题。流式细胞仪能够分选出你想得到的任何一亚群细胞，只要你想得到的某一亚群细胞有合适的单克隆抗体标记。　 细胞因子的检测：随着多标记及胞内细胞因子标记流式细胞技术的出现，使对细胞内细胞因子的研究推向了一个新的阶段。本文主要对胞内细胞因子流式细胞技术作介绍。　 血液学应用：文向您介绍流式细胞仪在血液研究领域的应用，包括DNA倍体分析及细胞周期分析，淋巴细胞亚群测定，白血病免疫分型，淋巴瘤免疫分型，红细胞疾病诊断，血小板功能分析和血小板病诊断，微小残留白血病检测，白细胞吞噬功能测定，NK和LAK细胞活性测定，造血干/祖细胞测定等

流式细胞术分析细胞因子，结果图分析，四个区域如何分析？分别代表什么？

这种四个象限的图，一般都是看两种染色的关系（横坐标和纵坐标）。

左下象限，是两种目标抗原都没有表达（染色阴性）。右上象限，是两种都有表达（双阳性）。

而左上象限则是纵坐标的那个抗原有表达（单阳性），但是横坐标那个没有表达（阴性）
右下象限是横坐标那个抗原有表达（单阳性），但纵坐标那个没有表达

这个图没有贴出来的是做实验时候的阴性对照（全部在左下象限），这样才能原来设置象限的位置。还有做代偿的对照（compensation control），是设置机器，排除假阳性用的。

求方法：怎么用流式细胞术检测血清中IL

目前最常用的方法就是使用微球阵的multiplex。早以商品化了。

以BD出品的为例，你可以购买现成的或者可以根据你要检测的不同细胞因子和厂家定制bead array。基本原理就是试剂盒含有多种微球，每一种都是两种不同荧光强度组合，所以在流式检测的时候会形成一个矩阵。每种微球上附着有可以识别一种细胞因子的抗体。和样本孵育后，再加入荧光标记的抗不同细胞因子的抗体（同样颜色）。这样，只要微球上结合有细胞因子，这个微球就会有三种荧光了。
前两种荧光来判断是哪种微球（哪种细胞因子），第三种荧光是识别抗体上的，来定量。试剂盒还会提供标准品，用来做标准曲线。

用流式细胞仪检测各个象限的意义

要看你是什么染料标记了例如临床上，最常用的荧光染料主要有三大种： FITC、PE和PeCy5。肉眼观察，FITC为绿色；PE为橙色； PeCy5为红色。它们都在488纳米被激发。检测波长分别是：FITC是525纳米；PE是575纳米；PeCy5是675纳米。实际上，荧光的变化是在一个范围内。这时候，荧光之间有可能重叠，需要进行荧光补偿的调节。所以可以看到，例如FITC和PE、PI，它们发出的波长有交叉，要想检测FITC，需要把PE和PI的信号去掉，也就是荧光补偿需要调节的意义。在临床上也是常常用两种荧光染料直接染色细胞，从而可以得到细胞更多的信息。例如在检测B细胞和T细胞的时候，可以用CD3和CD19同时加在试剂，可以同时与细胞进行孵育。我们将CD3标记成FITC，CD19标记成PE。有的淋巴细胞只表达CD3，有的细胞表达CD19；这样，我们就可以检测到CD3阳CD19阴的细胞就是T淋巴细胞；而CD3阴CD19阳的细胞就是B淋巴细胞。这样我们能够得到更有效的数据分析。

细胞内因子的流式检测是怎么回事？

细胞因子在淋巴细胞应答中有重要的免疫调节作用。细胞内因子的流式检测介绍，包括技术优势、操作步骤、应注意事项和染色结果对比。 随着研究的进展，仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括：ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析。。。 楼主可以到生物帮那里详细的了解下，那里有比较详细的介绍，我在上个星期看到过，生物帮内容主要包括生命科学领域产品、技术文档、视频等，可以看下 www.bio1000.com/zt/cell/46213.html 会找到介绍的。

骨髓细胞检查与流式细胞分析有什么区别

　　骨髓细胞检查与流式细胞分析的区别
　　骨髓细胞检查是指骨髓的细胞学检查，方法包括涂片细胞形态学检查，流式细胞仪检查，免疫组化等等，指的是一组诊断方法。
流式细胞分析指的是用流式细胞仪来分析细胞，可以使骨髓细胞，也可以是血细胞或者其他细胞，指的是一种技术。
　　骨髓细胞检查：骨髓检查可用于造血系统疾病的诊断，如对白血病的鉴别诊断、各种贫血的鉴别诊断、多发性骨髓瘤和血小板增加或减少性疾病的诊断； 骨髓检查还可用于某些感染性疾病如感染性心内膜炎时的骨髓培养有助于提高该病诊断的阳性率，在疟原虫和黑热病原虫感染时，通过骨髓检查有助于发现原虫并明确诊断； 某些恶性肿瘤时，通过骨髓检查可以确定是否有骨髓转移，因为骨髓是许多恶性肿瘤转移的好发部位。在肺癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌时易发生骨髓转移，可在骨髓检查中发现相应的肿瘤细胞。用于骨髓干细胞培养、染色体核型检查、骨髓细胞免疫学分型试验等。
　　流式细胞分析：流式细胞技术(Flow w Cytometry, FCM)是一种可以快速、准确、客观地同时检测单个微粒（通常是细胞）的多项特性，并加以定量的技术，具有速度快、精度高、准确性好等优点。‍它可以快速定量细胞内DNA,用于测定肿瘤细胞的DNA倍体类型和肿瘤组织中S+G2/M期的细胞占所有细胞的比例（生长分数）。测定肿瘤细胞的DNA倍体和生长分数不仅可以作为诊断恶性肿瘤的参考标志之一，而且可反应肿瘤的恶性程度和生物学行为。FCM还可应用于细胞的免疫分型，对临床免疫学检测起到重要作用。

细胞都飘起来了 为什么流式检测都是活的

刚飘起来不久的细胞并不就是死细胞啊。只不过是亚健康状态而已，只要有足够的条件，还是能恢复的。
我以前专门检测过的，搜集漂浮的细胞，重新种到一个新的培养皿，照样长出另外一盘。

流式细胞术和流式细胞分选技术的区别

这个并不是什么区别的问题。分选就是在流式分析的基础上在多加了一步而已，前面的步骤，原理都是一模一样的。分选的机器也可以用来分析。
分析技术，目前绝大多数都是液滴的形式。细胞通过检测窗口以后，搜集了数据，一般的分析仪器就直接排到废液箱了。而分选仪则继续通过尺寸微小的口径，并通过振动将液体流变成不连续的小液滴。然后根据上一步检测的结果，把包含要分选细胞的那个液体加上电荷。液滴通过小孔以后，马上就进入一个电压达到数千伏的电场，根据所加电荷的不同，会进入下面不同位置的收集管里面，从而完成分选。

想做流式细胞分选实验,请教具体步骤

具体的步骤都是很繁琐的，而且每个实验都不尽相同。只能告诉你这些原则：

第一步就是设计，你的分选标记是什么，如果是表面抗体标记，标记后会不会诱导细胞激活，会不会影响下游的实验，这些都要弄明白。
第二步，选择你所要用仪器兼容的荧光素。比如你们实验室的仪器没有紫外激光，可是你选用了只有紫外荧光才能激发的荧光素。仪器就不能识别
第三步，准备单细胞悬液。这个也要根据你的实验材料，是培养的细胞，还是整块的组织，或者悬浮细胞，方法有不同。需要找到自己最优化的方法。原则就是最大限度的得到活细胞而且保持细胞处于非粘附状态。
第四部，染色。
第五部，分选。根据实验的要求，可以收集到管子里，或者96孔盘，每孔一个细胞。也是根据实验要求而定

请教流式细胞的具体实验步骤本人是第一次做流式，所以

第一次做的话，有很多注意事项，最好先看一下网上的教程。我这里就先给以一些最基本的建议： 首先是你实验的设计。你没说要做什么实验，我姑且猜是抗体染色吧。选用荧光标记的单抗要和你所用的机器上所有的通道符合。不能选一个机器无法检测的荧光素所标记的抗体 如果是一种抗体染色，除了你的实验样本以外，另外还要准备两管对照，一是没有加任何抗体的，一管是同型对照（相同荧光素标记的同型非特异性抗体），如果是做了多色的，那每一种颜色都还需要一管单色对照 上机的话，你是第一次做肯定会有人帮你做的 样本上机前要用70 微米孔径的滤网过滤去掉团块，一面堵塞机器

流式细胞术的步骤？

流式细胞仪的操作和使用　　①打开电源，对系统进行预热； 　　 ②打开气体阈，调节　压力，获得适宜的液流速度；开启光源冷却系统； 　　 ③在样品管中加入去离子水，冲洗液流的喷嘴系统； 　　 ④利用校准标准样品，调整仪器，使在激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益调定的基础上，0和90散射的荧光强度最强，并要求变异系数为最小； 　　 ⑤选定流速、测量细胞数、测量参数等，在同样的工作条件下测量样品和对照样品；同时选择计算机屏上数据的显示方式，从而能直观掌握测量进程； 　　 ⑥样品测量完毕后，再用去离子水冲洗液流系统； 　 　⑦因为实验数据已存入计算机硬盘（有的机器还备有光盘系统，存贮量更大），因此可关闭气体、测量装置，而单独使用计算机进行数据处理； 　　 ⑧将所需结果打印出来。 细胞凋亡研究：细胞凋亡是细胞在基因控制下的有序死亡，在疾病发生、发展中有重要作用，因而研究细胞凋亡有重要意义。细胞凋亡检测方法很多，应用流式细胞仪技术可根据细胞在凋亡过程中发生一系列形态、生化变化从多个角度对细胞凋亡进行定性和定量的测定。

　 细胞分选：流式细胞仪能够分选某一亚群细胞,分选纯度＞95%。目前细胞分选主要用于研究，临床应用较少。利用流式细胞仪分选免疫担当细胞进行细胞免疫学研究也是目前的热门课题。流式细胞仪能够分选出你想得到的任何一亚群细胞，只要你想得到的某一亚群细胞有合适的单克隆抗体标记。　 细胞因子的检测：随着多标记及胞内细胞因子标记流式细胞技术的出现，使对细胞内细胞因子的研究推向了一个新的阶段。本文主要对胞内细胞因子流式细胞技术作介绍。　 血液学应用：文向您介绍流式细胞仪在血液研究领域的应用，包括DNA倍体分析及细胞周期分析，淋巴细胞亚群测定，白血病免疫分型，淋巴瘤免疫分型，红细胞疾病诊断，血小板功能分析和血小板病诊断，微小残留白血病检测，白细胞吞噬功能测定，NK和LAK细胞活性测定，造血干/祖细胞测定等

请教流式细胞术分析核蛋白的样品准备

核蛋白定位于细胞内，因此必须打孔后作胞内染色。实验步骤如下：
1、细胞特征性表面分子标记，以确认是你所需的细胞，如你做DC就可用CD11-FITC和Ia-PE先于标记。我们的方法是用10ul－15ul体积的反应体系，加0.5ul的相应抗体，4℃放置45分钟。
2、固定：直接加4%多聚甲醛200ul,4℃放置30分钟
3、打孔：加200ulPBS,5000转/分离心5分钟,弃上清，加27ul3%BSA和3ul10%Saponin(目前最有效的打孔剂），混匀，4℃放置15分钟
4、染色：加500ulPBS,5000转/分离心5分钟,弃上清。加10ul的左右的PBS，混匀，加0.5ul的你要检测的核蛋白荧光抗体（注意荧光不能和你第1步所用的荧光重叠），4℃放置60分钟
5、上样：加500ulPBS,5000转/分离心5分钟,弃上清。然后加200ulPBS混匀，即可上样。
………………
详细资料请参考：on
http://product.bio1000.com/100726/

请教：流式分选细胞前标本的处理以及注意事项

具体步骤都繁琐且每实验都尽相同能告诉些原则： 第步设计选标记表面抗体标记标记诱导细胞激影响游实验些都要弄明白 第二步选择所要用仪器兼容荧光素比实验室仪器没紫外激光选用紫外荧光才能激发荧光素仪器能识别 第三步准备单细胞悬液要根据实验材料培养细胞整块组织或者悬浮细胞同需要找自优化原则限度细胞且保持细胞处于非粘附状态 第四部染色 第五部选根据实验要求收集管或者9陆孔盘每孔细胞根据实验要求

一般流式细胞仪主要用于医院哪些科室?

流式细胞仪用于临床诊断：

白血病，淋巴瘤等血液科和肿瘤科的疾病

艾滋病的治疗检测，这个属于传染科

免疫科，移植科的免疫细胞检测，抗体筛选，自体免疫疾病的诊断。可溶性小分子的检测

肿瘤科的肿瘤细胞的DNA定量

谁家有用于BD流式细胞仪的中文检测报告系统

这个不需要专门的中文系统。不管哪个厂家的仪器，最后生成的都是FCS格式的文件。

对于样本量不大的实验室，流式细胞仪自带的软件完全可以满足报告的需求，而且流式的报告就是各个细胞群的百分比，并不需要翻译成中文。

对于样本量大的实验室，不方便一直占用连接仪器的电脑做分析报告。所以大都采用独立的分析电脑。仪器产生的FCS文件，通过局域网传送到分析电脑进行分析。同样也不需要专门的中文软件，因为都是各个细胞群的百分比。比如CD4+ 40%，加上散点图。一目了然。

用流式细胞仪检测各个象限的意义

要看你是什么染料标记了例如临床上，最常用的荧光染料主要有三大种： FITC、PE和PeCy5。肉眼观察，FITC为绿色；PE为橙色； PeCy5为红色。它们都在488纳米被激发。检测波长分别是：FITC是525纳米；PE是575纳米；PeCy5是675纳米。实际上，荧光的变化是在一个范围内。这时候，荧光之间有可能重叠，需要进行荧光补偿的调节。所以可以看到，例如FITC和PE、PI，它们发出的波长有交叉，要想检测FITC，需要把PE和PI的信号去掉，也就是荧光补偿需要调节的意义。在临床上也是常常用两种荧光染料直接染色细胞，从而可以得到细胞更多的信息。例如在检测B细胞和T细胞的时候，可以用CD3和CD19同时加在试剂，可以同时与细胞进行孵育。我们将CD3标记成FITC，CD19标记成PE。有的淋巴细胞只表达CD3，有的细胞表达CD19；这样，我们就可以检测到CD3阳CD19阴的细胞就是T淋巴细胞；而CD3阴CD19阳的细胞就是B淋巴细胞。这样我们能够得到更有效的数据分析。

生物实验室必备设备有哪些？

1、样品保存:冰箱/超低温冰箱(荷兰SKADI)液氮罐(英国STATEBOURNE CRYOGENICS)2、样品前处理:移液器(gilson,ependof,biocos)天平(梅特勒，赛多利斯)均质/搅拌系列(IKA,KINEMATICA,LABSCAN)离心机(sigma,日立，ebendof,hettich,beckman)冻干机(荷兰SKADI)高压灭菌器(MMM,SANYO,STURDY)电泳仪(bio-rad,epondorf)3、培养过程培养箱系列(美国SI)生物安全柜/超净工作台(telstar,baker,thermo)发酵罐(infors，labconco)摇床(IKA,INFORS,LAB-LINE)水浴(LABSCAN,JULABO)转瓶机(WHEATON,IBS)PCR(thermo，epondorf,ABI,BIO-RAD,MJ)酶标仪(Awareness，epondorf,ABI)4、观察分析显微镜(Hund,olympus，leica，nikon)菌落计数仪(INTERSCIENCE)流式细胞仪(bd,日立)DNA测序仪(ABI)高效色谱系列(agilent,whatman,abi,dionex,mathon)5、其它洗瓶机(labconco，miele)超纯水系列(MILLIPORE,ELGA,PALL)超声波清洗(英国Prima) 微生物实验室主要用于无菌环境下微生物提纯、分离、增殖及鉴定等工作，对无菌环境的要求很高。那么微生物实验室中需要用到哪些仪器设备呢？ 一、无菌室 无菌室是实验室的核心部分，主要为样品提供保护，保证实验结果的准确和人员的安全。 二、超净工作台 微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养，那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。超净工作台的主要用途是微生物的接种及处理时的无菌操作。 超净工作台 三、高压蒸汽灭菌锅 高压蒸汽灭菌锅是一个密闭的、可以耐受一定压力的双层金属锅。一般在进行无菌操作前需要将操作器皿、培养基等在高压灭菌锅里进行灭绝后才能使用。 四、培养箱 培养箱主要用于实验室微生物的培养，为微生物的生长提供一个适宜的环境。培养箱有以下几种： 1、普通培养箱 2、生化培养箱 3、恒温恒湿箱 4、厌氧培养箱 五、天平 天平是用于精确称量各类试剂及药品的设备。实验室常用的是电子天平。 六、微波炉/电炉 其主要作用是用于溶液的快速加热，微生物固体培养基的加热溶化等。 七、摇床 摇床又称摇瓶机，它是培养好气性微生物的小型试验设备或作为种子扩大培养之用。 八、冰箱 冰箱是实验室中保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存，有些要求是负20度保存，实验人员一定要看清试剂的保存条件，放置在恰当的温度下保存。 九、显微镜 微生物个体微小，必须借助显微镜才能观察清楚它们的个体形态和细胞结构。因此，在微生物学的各项研究中，显微镜就成为不可缺少的工具。 十、生物安全柜 微生物实验中所涉及到的部分试剂和样品微生物有些是有毒的，对于操作人员来说伤害比较大。为了防止有害德悬浮微粒、气溶胶的扩散，可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全的保护作用。 微生物实验室用到的仪器设备都有哪些 A2生物安全柜 十一、菌落计数器 菌落计数仪可帮助操作者计数菌落数量。通过放大，拍照，计数等方式来准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可直接连接电脑来完成自动计数的操作，方便快捷的计数。 十二、分光光度计 分光光度计在微生物试验中用于测定微生物悬液的浓度，可以正确选取合适的培养时间。 十三、离心机 离心机是用于收集微生物菌体以及其他沉淀物。有冷冻离心机和常温离心机之分。 十四、液氮罐 液氮罐里装有液氮，可用于微生物实验室中各菌种的长期保存。

流式细胞仪的原理是什么

质谱流式细胞技术都可以测量哪些参数

简单的说，只要能标记到抗体上的金属同位素，都可以通过质谱的形式分辨出来。所以可以同时检测很多目标。

所谓的参数，就是那些金属元素的分子量。一次可以检测几十个目标。

细胞检测为什么要用流式细胞检测技术

和其他技术相比，流式的特点如下：
可以一次在很短时间内检测大量的细胞数目，比如在数分钟内记录分析数百万的细胞。每个细胞都可以是多荧光染色的。根据机器的配置不同，可以同时分析20种左右的指标。特点总结为简单的词就是，快，多。
流式不光能检测细胞，凡是大小和细胞相仿的颗粒，都可以检测。所以现在还发明了以微球为基础的溶液细胞因子检测，一次可以检测数十种的细胞因子浓度。

用流式细胞仪检测细胞周期，观察哪些指标可以反应增殖，观察哪些指标可以反应阻滞？

你这个试验必须要用BRDU加PI来检测。pause-chase

抑制分裂，如果是抑制了最后一步，就会出现G2期的堆积，G1期减少。如果抑制的是DNA合成，就会出现BRDU阳性细胞的减少

促进的药物会发现各个时间点细胞周期的有变化。你最好贴个图我给你分析一下

流式细胞术可以检测细胞的表型吗

应用流式细胞术检测双表型急性白血病.方法:用直接荧光标记的单克隆抗体分析双表型急性白血病的免疫表型.结果:①双表型白血病的构成比例是3.16%（28/886）,其中B/M双表型白血病占64.28%,T/M双表型白血病占25.00%,T/B双表型白血病占10.71%.②B/M双表型白血病均共同表达细胞质cCD79a和cMPO;T/M双表型白血病均共同表达细胞质cCD3和cMPO;T/B双表型白血病均共同表达细胞质cCD3和cCD79a.③形态学诊断为急性非淋巴细胞白血病4例,急性淋巴细胞白血病6例,经流式细胞术分析均为双表型急性白血病.结论:①双表型白血病以B/M系抗原共同表达最常见;②cCD3、cCD79a、cMPO为系列特异性标志抗原,对诊断及鉴别双表型急性白血病极为重要;③流式细胞术是目前诊断双表型急性白血病特异可靠的方法.

骨髓细胞检查与流式细胞分析有什么区别

　　骨髓细胞检查与流式细胞分析的区别
　　骨髓细胞检查是指骨髓的细胞学检查，方法包括涂片细胞形态学检查，流式细胞仪检查，免疫组化等等，指的是一组诊断方法。
流式细胞分析指的是用流式细胞仪来分析细胞，可以使骨髓细胞，也可以是血细胞或者其他细胞，指的是一种技术。
　　骨髓细胞检查：骨髓检查可用于造血系统疾病的诊断，如对白血病的鉴别诊断、各种贫血的鉴别诊断、多发性骨髓瘤和血小板增加或减少性疾病的诊断； 骨髓检查还可用于某些感染性疾病如感染性心内膜炎时的骨髓培养有助于提高该病诊断的阳性率，在疟原虫和黑热病原虫感染时，通过骨髓检查有助于发现原虫并明确诊断； 某些恶性肿瘤时，通过骨髓检查可以确定是否有骨髓转移，因为骨髓是许多恶性肿瘤转移的好发部位。在肺癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌时易发生骨髓转移，可在骨髓检查中发现相应的肿瘤细胞。用于骨髓干细胞培养、染色体核型检查、骨髓细胞免疫学分型试验等。
　　流式细胞分析：流式细胞技术(Flow w Cytometry, FCM)是一种可以快速、准确、客观地同时检测单个微粒（通常是细胞）的多项特性，并加以定量的技术，具有速度快、精度高、准确性好等优点。‍它可以快速定量细胞内DNA,用于测定肿瘤细胞的DNA倍体类型和肿瘤组织中S+G2/M期的细胞占所有细胞的比例（生长分数）。测定肿瘤细胞的DNA倍体和生长分数不仅可以作为诊断恶性肿瘤的参考标志之一，而且可反应肿瘤的恶性程度和生物学行为。FCM还可应用于细胞的免疫分型，对临床免疫学检测起到重要作用。

请问一下用流式细胞仪检测细胞凋亡的试验中，为什么要用PBS洗涤两次呢？用PBS洗涤的原理是什么呢？

PBS是一种缓冲液，他的渗透压与一般细胞的相同，在做细胞试验或者活体组织实验中，一般就把PBS当做水来用，各种冲洗的过程什么的都是用它。这样不会改变细胞形态~

原理 流式细胞仪根据细胞中dna含量的不同对细胞分别计数

A、由以上分析知，对照组和试验组的细胞数目在a峰中细胞的DNA含量均为40，在b峰中细胞的DNA含量均为80，所以b峰中细胞的DNA含量是a峰中的2倍，A错误；
B、在a峰与b峰之间细胞内的DNA在逐渐加倍，所以正进行着DNA分子的复制，B正确；
C、DNA的复制发生在间期，处于细胞分裂期的细胞中DNA是加倍的，所以处于分裂期的细胞均被计数在b峰中，C错误；
D、比较实验组和对照组中的b峰细胞的数量，可以看出实验组中进行DNA复制的癌细胞数量明显减少，说明该药物对癌细胞DNA复制有抑制作用，D错误．
故选：B．

流式细胞仪测定细胞周期各时相的原理和基本步骤（不用说具体使用的量）

在细胞培养液中加入模拟核苷酸EdU （比较老的方法也可以用BrdU）。培养一小时 后，更换为正常的培养液继续培养。模拟核苷酸可以像天然核苷酸一样被细胞摄取并整合入新合成的DNA。 培养一段时间后（一般小于一个细胞周期），固定细胞。根据所使用模拟核苷酸的不同，使用不同的方法。EdU，改变缓冲液的pH值，就会发出荧光。而BrdU则需用荧光抗体识别，需要对细胞膜和核膜进行通透处理。 再加入PI对DNA染色。 在二维坐标图上，横坐标设为线性PI荧光强度，纵坐标设为模拟核苷酸的荧光强度（log）。 典型的图就像下面一样： G1, G2 和S期就按照图中的划分来做。G1期的细胞没有新合成DNA，所以BrdU信号是阴性，而PI的信号位于1倍体期。S期是正在合成DNA，所以BrdU都是阳性。G2期是已经合成好了2倍的DNA，所以位于2倍体期，信号是G1期的一倍。这个图中，G1 PI信号是300， G2就是600.

流式细胞仪原理

我简单说一下：
1. 首先，机器吸取细胞混悬液，射入由鞘液（一般都是磷酸盐缓冲液）。由于鞘液的流速大，所以细胞混悬液通过轴流的形式在中央，一般是单个细胞排队的形式。

2. 然后细胞通过检测窗口。有激光束照射。一般细胞都经过荧光染色，被激光照射后，会有不同波长的激发光产生。机器设有检测器来探测激发光的强弱

3. 根据激发光的强弱，来判断细胞和染色物质的结合情况，从而得到要检测的结果（比如抗原量，DNA量，等等）

流式细胞仪的原理和操作过程

　　原理：
　　流式细胞仪可同时进行多参数测量，信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号。测量是在测量区进行的，所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。液流中央的单个细胞通过测量区时，受到激光照射会向立体角为2π的整个空间散射光线，散射光的波长和入射光的波长相同。散射光的强度及其空间分布与细胞的大小、形态、质膜和细胞内部结构密切相关，因为这些生物学参数又和细胞对光线的反射、折射等光学特性有关。未遭受任何损坏的细胞对光线都具有特征性的散射，因此可利用不同的散射光信号对不经染色活细胞进行分析和分选。经过固定的和染色处理的细胞由于光学性质的改变，其散射光信号当然不同于活细胞。散射光不仅与作为散射中心的细胞的参数相关，还跟散射角、及收集散射光线的立体角等非生物因素有关。
　　在流式细胞术测量中，常用的是两种散射方向的散射光测量：①前向角（即0角）散射（FSC）；②侧向散射（SSC），又称90角散射。这时所说的角度指的是激光束照射方向与收集散射光信号的光电倍增管轴向方向之间大致所成的角度。一般说来，前向角散射光的强度与细胞的大小有关，对同种细胞群体随着细胞截面积的增大而增大；对球形活细胞经实验表明在小立体角范围内基本上和截面积大小成线性关系；对于形状复杂具有取向性的细胞则可能差异很大，尤其需要注意。侧向散射光的测量主要用来获取有关细胞内部精细结构的颗粒性质的有关信息。侧向散射光虽然也与细胞的形状和大小有关，但它对细胞膜、胞质、核膜的折射率更为敏感，也能对细胞质内较大颗粒给出灵敏反映。
　　在实际使用中，仪器首先要对光散射信号进行测量。当光散射分析与荧光探针联合使用时，可鉴别出样品中被染色和未被染色细胞。光散射测量最有效的用途是从非均一的群体中鉴别出某些亚群。
　　荧光信号主要包括两部分：①自发荧光，即不经荧光染色细胞内部的荧光分子经光照射后所发出的荧光；②特征荧光，即由细胞经染色结合上的荧光染料受光照而发出的荧光，其荧光强度较弱，波长也与照射激光不同。自发荧光信号为噪声信号，在多数情况下会干扰对特异荧光信号的分辨和测量。在免疫细胞化学等测量中，对于结合水平不高的荧光抗体来说，如何提高信噪比是个关键。一般说来，细胞成分中能够产生的自发荧光的分子（例核黄素、细胞色素等）的含量越高，自发荧光越强；培养细胞中死细胞/活细胞比例越高，自发荧光越强；细胞样品中所含亮细胞的比例越高，自发荧光越强。
　　减少自发荧光干扰、提高信噪比的主要措施是：①尽量选用较亮的荧光染料；②选用适宜的激光和滤片光学系统；③采用电子补偿电路，将自发荧光的本底贡献予以补偿。


操作过程：
①打开电源，对系统进行预热；
②打开气体阈，调节　压力，获得适宜的液流速度；开启光源冷却系统；
③在样品管中加入去离子水，冲洗液流的喷嘴系统；
④利用校准标准样品，调整仪器，使在激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益调定的 基础上，0和90散射的荧光强度最强，并要求变异系数为最小；
⑤选定流速、测量细胞数、测量参数等，在同样的工作条件下测量样品和对照样品；同时选 择计算机屏上数据的显示方式，从而能直观掌握测量进程；
⑥样品测量完毕后，再用去离子水冲洗液流系统；
⑦因为实验数据已存入计算机硬盘（有的机器还备有光盘系统，存贮量更大），因此可关闭 气体、测量装置，而单独使用计算机进行数据处理；
⑧将所需结果打印出来。